参考原理:血液中单个蛋白质分子的检测有助于识别许多新的诊断性蛋白质标记物。我们报告了一种同时检测数百至数千个单独蛋白质分子的方法,该方法能够检测到非常低浓度的蛋白质。蛋白质被捕获在显微珠上,并用酶标记,每个显微珠上有一个或零个酶标记的蛋白质。通过将这些显微珠分离成50飞米的阵列反应室,单个蛋白质可以通过荧光想象检测到。通过单化这些阵列中的分子,~10-20种酶可以在100μL(~10−19M)中检测到。单个基于酶标记的分子酶联免疫吸附试验(数字ELISA)能够检测血清中临床相关的蛋白质,其浓度(<10−15M)远低于传统ELISA3-5。数字ELISA在所有接受防冶性前列腺切除术的患者血清中检测到前列腺特异性抗原,比较低至14fmol/mL(0.4fmol)。
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芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
珠子以两种不同的方式读出。首先,在与100μMresorufin-阝-D孵育1小时后,用荧光板读出器以100μL方式读出珠子结合-半乳糖苷(RGP),一种荧光底物for阝-半乳糖苷酶。在平板阅读器上,检测限为15fMofS阝G(图2)。其次,将珠子加载然后将RGP溶液密封到阵列的孔中,单个酶的信号被允许在反应室中积累,并每30秒获取一次荧光图像。实验结束时获取阵列的白光图像以识别含有珠子的孔(含有珠子的孔散射光与空井不同)。荧光图像用于确定哪些微球具有相关的结合酶(从时间变化的荧光图像中强度增加)。图2显示了微球中含酶的比例与总体S阝G浓度的关系的对数-对数图。检测到的比较低酶偶联物浓度为350飞摩尔(zM),并通过外推信号等于的酶浓度计算得出的检测限(LOD)。 单分子阵列数字ELISA超敏检测芯弃疾JX-8B数字ELISA,超敏检测,理论可达飞克级;
芯弃疾JX-8B数字化高灵敏ELISA芯片检测产品为什么能做到?
先进新型的单分子检测方法的普及版;每个生物/医学实验室都用得起的单分子免疫检测;使用现有平台就能做的单分子免疫检测且具有以下特点:多重、超敏微量、极速灵活、开放;
我们的芯弃疾.单分子ELISA产品:同样的单分子技术方案,但创新性芯片方案,主要过程均芯片上完成,只有需搭配简单小型实验室设备,或实验室常见已有设备;实现单分子检测方案的小型化、灵活使用、低成本。更符合国内实验室的各种科研使用场景
芯弃疾JX-8B数字化高灵敏ELISA芯片检测产品;应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。
生物实验室、医学实验室常见问题:ELISA使用繁琐、用时长、样本用量大、使用不够灵活。使用方法比较繁多,用时长,每次检测可能要花几个小时,经常半天就测试了一轮工艺;如果要根据结果来改善,就得再花上半天、一天;使用和实验安排不够灵活。ELISA试剂盒每次购买和使用,大多都要以整版方式进行,不够灵活。 芯弃疾JX-8B数字ELISA,多重检测,同一样本就能测试2-6项指标;
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。循环血液转化为~2×10−15M(或2飞摩尔,fM);早期HIV传染血清中每mL含有10-3000个病毒颗粒,相当于p24抗原浓度范围为从50×10−18M(50attomolar,aM)到15×10−15M(15fM)10.尝试开发能够测量这些蛋白质浓度的方法集中在蛋白质上的核酸标记复制,11,12或测量整体、结合标记蛋白分子的性质13-16。Mirkin等人12,17及其他研究者18使用基于金纳米颗粒和DNA生物条形码的标记物,已将蛋白质的检测范围扩展至低飞摩尔水平;更近使用该技术的一篇报道展示了检测到10飞摩尔PSA插入物17。这些方法所达到的灵敏度然而,检测蛋白质仍然落后于核酸,如聚合酶链反应(PCR),从而限制了蛋白质组中具有已在血液中检测到6,19。单个蛋白质分子的分离和检测为测量极低浓度的蛋白质s1,2提供了一种有希望的方法。 4)数字化高敏ELISA芯片,微量样本实现多重快速检测!科研场景用数字ELISA使用灵活
芯弃疾JX-8B数字ELISA,多重检测,同时测试2-6个检测项目;芯弃疾-勃望初芯数字ELISA厂家
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每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
人类形式的蛋白质被加入到25%牛血清中以代替临床测试样本;通常使用四倍稀释因子以减少免疫测定中的基质效应4。使用数字ELISA检测25%血清中的PSA,从该实验中确定了LOD为~50aM(1.5fg/mL),相当于整个血清中的LOD为~200aM(6fg/mL)。检测到的比较低浓度为250aM,相当于25%血清中的1fMin全血清。由于LOD是通过外推背景浓度来确定的加上背景的三个标准差,不同运行的LOD取决于背景的CV。在具有典型背景方差的几个实验中,全血清PSA的亚飞摩尔LOD得以保持。相比之下,一种前列的商业PSA检测方法(ADVIACentaur,西门子)报告在人血清中的LOD为3pM(0.1ng/mL),并且已经报道了LOD在10-30fM17,26。 芯弃疾-勃望初芯数字ELISA厂家
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